Три составные части успеха ноосферы.
|
Выпуск 232 Лаборатория Наномир Когда реальность открывает тайны, Три составные части успеха ноосферы
1. Программа создания эликсира "вечной молодости".
Изучить омолаживающий эффект модификации гормонального фона и частичной иммуносупрессии, которые развиваются при беременности, на модели гетерохронного парабиоза ГУ «Институт геронтологии АМН Украины», Киев Лаборатория
«Наномир», Москва Старение организма – многофакторный процесс, обусловленный, в том числе, и утратой регенеративного потенциала стволовых клеток. Оказывается, существует прямая связь между химическими сигналами, присутствующими в старой крови, и утратой способности тканей к регенерации [ 1, 2, 3, 4 ]. Это, в большинстве случаев, сводит к нулю эффективность терапии с применением стволовых клеток в частности [ 5 ], и является одной из главных причин старения организма в целом. Следовательно, выявление и блокировка этих сигналов является важнейшей задачей антивозрастной терапии. Угнетающее действие сыворотки крови старых людей и животных на рост клеток в культуре впервые было выявлено еще в 1921 году A. Carrel и A. H. Ebeling. Они показали, что рост культуры фибробластов цыплят зависит от возраста донора, сыворотку которого использовали для культуральной среды [ 6 ]. С тех пор с феноменом существования факторов старения, переносимых с кровью, сталкивалось большое количество исследователей. Так, например, японские авторы показали, что сыворотка крови старых людей способна подавлять пролиферацию Т-лимфоцитов in vitro. При использовании в качестве контролей сывороток пациентов с гепатомами, или сывороток беременных женщин, авторы установили, что факторы «старения», находящиеся в сыворотках старых людей, обладают уникальным механизмом супрессии пролиферации лимфоцитов, и, в отличие от других сывороток, способны неспецифически подавлять рост клеток на любом этапе активации [ 7 ]. Более того, в работе Бутенко Г. М. и др. было показано, что пациенты, сыворотка которых обладает выраженным ингибирующим действием в реакции бласттрансформации in vitro, имеют ограниченный срок жизни и умирают в течение ближайших 2-х лет с момента тестирования [ 8 ]. Подобный эффект был обнаружен на модели гетерохронного парабиоза − в эксперименте у молодых мышей, партнеров по парабиозу, появляются выраженные возрастные изменения иммунологических функций, которые прогрессируют по мере сосуществования животных, и которые, очевидно, передаются с кровью [ 9 ]. В 2010 году израильскими учеными было показано, что беременность стимулирует регенераторные возможности организма матери. Установлено, что у беременных самок мышей возрастом 10-12 месяцев скорость восстановления печени после гепатэктомии увеличивается вдвое, в то время как у молодых мышей скорость регенерации печени не зависит от наличия беременности [ 10 ]. Авторы предполагают, что при беременности в крови появляются факторы, способные тормозить процессы старения. Целью данного исследования является выявление фактора, появление которого в кровотоке беременных самок способствует улучшению процессов регенерации и тормозит возникновение возрастных нарушений иммунной системы. Задачи проекта: на модели гетерохронного парабиоза, которая представляет собой химеру из двух животных разного возраста, которые имеют общую кровеносную систему, изучить влияние беременности на возникновение возрастных изменений иммунной системы у партнеров разного возраста. Дизайн 1-го этапа эксперимента:
1. Животные − мыши самки линии СВА/Са возрастом 3 мес (молодые), 10−12 мес (стареющие), 21−23 мес (старые). 2. Экспериментальная модель − создание парабиотических пар. 3. Экспериментальные группы: 3.1. Проверка влияния беременности молодого партнера на процессы старения иммунной системы на модели гетерохронного парабиоза. Молодые изохронные пары − молодая мышь, сшитая с молодой ложнобеременной, 10 пар. Молодые изохронные пары − молодая мышь, сшитая с молодой беременной, 10 пар. Гетерохронные пары − молодая мышь, сшитая со старой, 10 пар. Гетерохронные пары − молодая беременная мышь, сшитая со старой, 10 пар. 3.2. Проверка влияния беременности стареющего партнера на процессы ускоренного старения иммунной системы у молодых партнеров по гетерохронному парабиозу. Гетерохронные пары − молодая мышь, сшитая со 10-12 мес ложнобеременной мышью, 10 пар. Гетерохронные пары − молодая мышь, сшитая со 10-12 мес беременной мышью, 10 пар. Стареющие изохронные пары − 10-12 мышь сшитая с 10-12 мес ложнобеременной мышью, 10 пар. 4. Схема проведения эксперимента: 4.1. Вазектомия самцов для обеспечения ложной беременности контрольных самок. 4.2. Проведение операций по созданию парабиотических пар. 4.3. Через 7 дней после проведения операций провести полноценное или ложное оплодотворение экспериментальных животных. 4.4. Через 15-20 дней после оплодотворения провести тестирование показателей состояния иммунной системы. 5. Тестируемые показатели: 5.1. Уровень прогестерона в плазме крови. 5.2. Визуальная проверка беременности (наличие плодов в матке, оценка предположительного срока). 5.3. Оценка состояния иммунной системы − проверка массы тимуса, пролиферативной активности спленоцитов, субпопуляционного состава Т-клеток селезенки. 5.4. Сбор и криосохранение плазмы крови экспериментальных животных.
Дизайн 2-го этапа эксперимента: При всём существующем на сегодняшний день наборе методик идентификация регуляторных факторов процессов старения является довольно трудной задачей. Известно достаточно большое количество случаев, когда попытки идентификации регуляторных факторов не давали никаких результатов. Для решения подобных задач нами разработан и апробирован набор оригинальных методик, позволяющий находить комбинации управляющих сигналов, что делает возможным обнаружение химической природы регуляторных факторов. Поиск факторов старения сыворотки крови предполагает широкий скрининг с оценкой суммарной ингибирующей активности тестируемой сыворотки на культурах клеток in vitro; а также последующих за этим этапах разделения сывороточных фракций с использованием различных методологических подходов: ультрацентрифугирование, хроматография, высаливание, диализ, электрофорез, обработка ДНКазами, РНКазами, протеазами, специфическими антителами. С последующим тестированием на культурах клеток in vitro с целью выявления фракций, обладающих максимальным ингибирующим или стимулирующим эффектом. Еще один возможный подход − анализ факторов плаценты, обладающих эффектом «антистарения». Данный подход является более сложным для анализа, поскольку требует этапа разрушения клеток с последующим выделением биологически-активных фракций. Поскольку мы не знаем, к какому типу биологических молекул относятся активные факторы плаценты, достаточно сложно выбрать процедуру их экстракции. Поэтому, с нашей точки зрения, более логично начать с поиска факторов плазмы крови, которые появляются в крови беременных особей. Выявление специфических факторов старения (или антистарения) организма позволит установить их структуру и разработать подходы к их нейтрализации в организме. 1. Анализ состава фракций плазмы крови, которые будут обладать ингибирующим или стимулирующим действием на рост и дифференцировку клеток in vitro. Разделение на плазмы на подфракции с использованием ультрацентрифугирования с использованием молекулярных фильтров. Обработка подфракций протеазами, ДНКазами, РНКазами, использование хроматографии, высаливания, диализа, электрофореза, и тестирование полученных подфракций на культурах клеток мыши in vitro. Основная цель фрагмента − выявить ключевую молекулу(ы), обладающую(ие) искомой биологической активностью. 2. Анализ структуры искомой молекулы с использованием масс-спектрометрии или других соответствующих подходов в зависимости от предполагаемой природы полученной субстанции. 3. Проверка эффекта введения полученной субстанции in vivo на животных. 4. Разработка подходов к блокированию (элиминации) предполагаемой субстанции в организме.
Бюджет исследования.
Литература: 1. Conboy I.M., M.J. Conboy, A.J. Wagers, E.R. Girma, I.L. Weissman, T.A. Rando. Rejuvenation of aged progenitor cells by exposure to a young systemic environment // Nature, Vol 433, 17 February 2005. 2. S.R. Mayack, J.L. Shadrach, F.S. Kim & A.J. Wagers. Systemic signals regulate ageing and rejuvenation of blood stem cell niches. Nature, Vol 463, 28 January 2010. 3. Hiroshi Kondo, Yumiko Yonezawa and Hideki Ito. Inhibitory Effects of Human Serum on Human Fetal Skin Fibroblast Migration: Migration-Inhibitory Activity and Substances in Serum, and Its Age-Related Changes In Vitro // Cellular & Developmental Biology. Animal Vol. 36, No. 4 (Apr., 2000), pp. 256-261. 4. Зуев В.А., Автандилов Г.Г., Игнатова Н.Г., Быковская С.И. Индуцированное старение мышей // Бюлл. Эксп. Биол. Мед. – 2003. – Т. 136, № 3. – С. 286-287. 5. Dimmeler S., A. Leri. Aging and Disease as Modifiers of Efficacy of Cell Therapy // Circulation Research. 2008;102:1319-1330.6. Carre, A., and Ebeling, A. H., J. Heterogenic serum, age, and multiplication fibroblasts // Exp. Med., 1921, xxxiv, 599. 7. Masato Tsujimoto, Tadaaki Tsuda, Masahiro Ohata. Mechanisms of Inhibitory Effect of Serum from Old Subjects on Lymphocyte Responsiveness to Mitogen // Japanese journal of geriatrics.− Vol.18 , No.5(1981)pp.361-369 8. Бутенко Г. М., Зайченко А. П. Использование иммунологических показателей для прогнозирования течения старения и болезней // Геронтология и гериатрия: Ежегодник. 1990: Превентивная геронтология и гериатрия, К., 1991. – С. 67-71. 9. Пишель И. Н., T. А. Дубилей, A. Е. Родниченко, Н. А. Утко, Ю. И. Леонов, С. А. Мигован, M. В. Азарскова, В. М. Kирик, Т. А. Бадова, О. А. Евтушенко, П. П. Kлименко, Н. Г. Ахаладзе, В. І. Варус, Х. К. Mурадян, Г. М. Бутенко. Прогрессивное снижение иммунологических функций при гетерохронном парабиозе: результаты предварительного исследования // Пробл. старения и долголетия. − 2008. − Т.17, № 2. − С. 164−173.10. Y. Gielchinsky, N. Laufer, E. Weitman, et al. Pregnancy restores the regenerative capacity of the aged liver via activation of an mTORC1-controlled hyperplasia/hypertrophy switch // Genes Dev. 2010 24: 543-548 2. Второй удачный эксперимент в Дубне.
Приблизительно
так будет выглядеть рубиновая "вечная лампочка". Это почти реальный кадр.  Но в реальности существует только один шарик из ИАГ-Cr, настроенный в резонанс с лучом из ускорителя в Дубне. У меня есть только три этих видеокадра со второго эксперимента в Дубне. Второй эксперимент в конце мая был проверочным. Специалисты решили убедиться, что в гранатовом шарике N2 действительно происходит свечение на колебательной моде "шепчущей галереи". И им это удалось. К сожалению, работа ускорителя снова прервана на неопределённый срок. Если бы вместо одного гранатового шарика у специалистов был рубиновый генератор, который при комнатной температуре имел ту же резонансную частоту, то микроволновая энергетика, вероятно, уже была бы создана. Но для этого нужно иметь много рубиновых шариков. Купить их инвесторы не могут, т.к. "много шариков" - это дороже 5000 долл. Плавно менять температуру специалисты из Дубны не берутся. Объясняют это отсутствием технических возможностей. Аппаратура для точного дистанционного управления температурой и резонансной частотой рубинового генератора может стоить ещё дороже, чем сотня рубиновых шариков. Есть ли возможность удешевить проект? Да. В том случае, если удастся найти сырьё, из которого можно сделать сотни рубиновых шариков. В настоящее время мне неизвестно, где можно приобрести рубин N11 оптического качества, из которого можно делать шарики размером 9-12 мм. Модель тРНК ещё не доделана, но уже понятно, как она работает. Осталось уточнить нюансы...
 Модель перекрестия тРНК без вариабельной петли (фрагмент, состоящий из 6 комплементарных пар нуклеотидов). Скрипт, который строит пикотехнологическую (кольцегранную) модель ДНК/РНК: p = #(); p1 = #(); p2 = #(); aa = #(); ax = #(); ay = #(); r = #() Для создания пикотехнологических моделей протяжённых участков ДНК/РНК созданы упрощённые (многогранные) модели нуклеотидов... 
Скрипт, который строит упрощённую (многогранную) пикотехнологическую модель ДНК/РНК: -- Nanoworld Laboratory aa = #(); ax = #(); ay = #(); nuclcol = #() newmat = multimaterial name:"MyMultiMat" numsubs: (14) Всё это, дорогие читатели, Вы можете читать благодаря постраничной копии форума лаборатории Наномир, уничтоженного преступной группировкой, совершившей (и продолжающей совершать) сотни преступлений против лаборатории Наномир с 2006 года по настоящее время. Добро пожаловать на новый форум лаборатории Наномир! |
| В избранное | ||
